NMDAε3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402942-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NMDAε3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase NMDAε3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase NMDAε3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GRIN2C. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NMDAε3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402942-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NMDAε3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402942-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GRIN2C codifica a subunidade do recetor NMDA NMDAε3 (GluN2C), um componente de canal iónico ativado por glutamato que se monta com NR1 e outras subunidades NR2 para regular a transmissão sináptica excitatória. A NMDAε3 contribui para as propriedades biofísicas do recetor que moldam o influxo de cálcio, a plasticidade sináptica e a expressão génica dependente da atividade, ligando-a a vias centrais do neurodesenvolvimento e da sinalização sináptica. Ao acoplar-se a cascatas a jusante dependentes de Ca2+, como programas de transcrição relacionados com CaMK e CREB, o GRIN2C influencia a maturação das redes neuronais e a função dos circuitos. Alterações na composição das subunidades do recetor NMDA e a desregulação de GRIN2C têm sido estudadas no contexto de fenótipos neuropsiquiátricos e do neurodesenvolvimento, apoiando a sua relevância para estudos mecanísticos da neurotransmissão excitatória.
NMDAε3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GRIN2C em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GRIN2C. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GRIN2C. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GRIN2C interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.