nm23-H2 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-421912-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- nm23-H2O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase nm23-H2 (m) e o Plasmídeo Double Nickase nm23-H2 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Nme2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:nm23-H2 Anticorpo (X-42): sc-100400
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
nm23-H2 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-421912-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
nm23-H2 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-421912-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O Nme2 de camundongo codifica o nm23-H2, uma quinase de difosfato de nucleosídeo com atividades regulatórias adicionais em compartimentos nucleares e citoplasmáticos que sustentam a homeostase de nucleotídeos e o controle amplo do metabolismo celular. O nm23-H2 tem sido associado à regulação transcricional, a processos ligados a DNA e RNA e à modulação de redes de sinalização que influenciam a proliferação celular, a diferenciação e respostas ao estresse. Por meio de suas funções na manutenção dos pools de nucleotídeos e na participação em interações proteína–proteína e com ácidos nucleicos, o Nme2 pode afetar a manutenção do genoma e a progressão do ciclo celular. Alterações na atividade da família nm23 têm sido relacionadas a fenótipos associados ao câncer e ao comportamento metastático em múltiplos sistemas experimentais, apoiando seu uso como um nó mecanístico para o estudo da biologia tumoral e de vias relacionadas.
nm23-H2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Nme2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Nme2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Nme2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Nme2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.