Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
NKG2-D Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-424169
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NKG2-D O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico NKG2-D, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:NKG2-D Anticorpo (A-7): sc-515599
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NKG2-D Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-424169 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Klrk1 codifica o imunorreceptor ativador NKG2-D (KLRK1), um receptor do tipo lectina C “semelhante a lectina” transmembranar do tipo II, expresso em células NK de camundongo e em subpopulações de células T CD8+. O NKG2-D reconhece ligantes induzíveis por estresse e sinaliza por meio de proteínas adaptadoras para iniciar vias associadas a PI3K, Vav1 e Syk/ZAP70, que promovem a liberação de grânulos citotóxicos, a produção de citocinas e a vigilância imunológica. Esse eixo integra sinais de dano ao DNA, infecção e transformação celular para moldar respostas efetoras inatas e adaptativas. Interações desreguladas entre NKG2-D e seus ligantes têm sido implicadas em evasão imune tumoral, inflamação crônica e controle alterado de tecidos infectados por vírus ou sob estresse em modelos experimentais.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO NKG2-D (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Klrk1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Klrk1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Klrk1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína NKG2-D.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Klrk1 para a investigação da sinalização de NKG2-D, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Klrk1 críticos para a função NKG2-D
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Klrk1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo NKG2-D Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo NKG2-D Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Klrk1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo NKG2-D Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR NKG2-D (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Klrk1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Klrk1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.