NIK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-424749
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NIK O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico NIK, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:NIK Anticorpo (A-12): sc-8417
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NIK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-424749 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Map3k14 codifica a quinase indutora de NF-κB (NIK), uma MAP3K que atua como regulador central da via não canônica de NF-κB em células de camundongo. A NIK integra sinais de determinados membros da superfamília de receptores de TNF para promover o processamento de NF-κB2 p100 em p52 via IKKα, moldando assim programas de transcrição que controlam a organogênese linfoide, a maturação de células B, a função de células dendríticas e redes de citocinas inflamatórias. O controle rigoroso da estabilidade da NIK é fundamental para a homeostase imune, e a sinalização desregulada de NIK tem sido associada à inflamação crônica, desregulação imune e processos oncogênicos em compartimentos linfoides e estromais. Como um nó de sinalização a montante de NF-κB2/RelB, a NIK é frequentemente estudada em contextos como fenótipos semelhantes aos autoimunes, remodelamento imune induzido por infecção e microambientes inflamatórios associados a tumores.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO NIK (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Map3k14 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Map3k14, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Map3k14 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína NIK.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Map3k14 para a investigação da sinalização de NIK, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Map3k14 críticos para a função NIK
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Map3k14 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo NIK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo NIK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Map3k14. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo NIK Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR NIK (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Map3k14 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Map3k14 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.