Nicotinic Acetylcholine Receptor gamma/CHRNG Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-418961

Visão geral

Chrng codifica a subunidade gama do receptor nicotínico de acetilcolina (nAChR), um canal de cátions controlado por ligante que se monta com outras subunidades do nAChR do tipo muscular para mediar a despolarização dependente de acetilcolina na junção neuromuscular. No desenvolvimento do camundongo, o CHRNG é um componente-chave do complexo receptor fetal e sustenta a sinaptogênese, a maturação do músculo esquelético dependente de atividade e o controle da excitabilidade por meio de fluxo iônico rápido e sinalização downstream ligada a Ca2+. Alterações na expressão de CHRNG ou na composição de subunidades podem perturbar a transmissão neuromuscular e os programas de diferenciação das miofibras, oferecendo um ponto de entrada mecanístico para estudar fenótipos neuromusculares congênitos e do desenvolvimento. Assim, este gene é relevante para vias que regulam a formação da placa motora, o acoplamento excitação–contração e o timing do desenvolvimento muscular.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Nicotinic Acetylcholine Receptor gamma/CHRNG (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Chrng em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Chrng, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Chrng na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Nicotinic Acetylcholine Receptor gamma/CHRNG.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Chrng para a investigação da sinalização de Nicotinic Acetylcholine Receptor gamma/CHRNG, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Chrng críticos para a função Nicotinic Acetylcholine Receptor gamma/CHRNG
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Chrng para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Nicotinic Acetylcholine Receptor gamma/CHRNG Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Nicotinic Acetylcholine Receptor gamma/CHRNG Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Chrng. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Nicotinic Acetylcholine Receptor gamma/CHRNG Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Nicotinic Acetylcholine Receptor gamma/CHRNG (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Chrng para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Chrng definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.