Nicotinic Acetylcholine Receptor epsilon/CHRNE Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-418960

Visão geral

Chrne codifica a subunidade épsilon do receptor nicotínico de acetilcolina (nAChR) do tipo muscular, um canal iónico regulado por ligando concentrado na membrana pós-sináptica da junção neuromuscular. A incorporação de CHRNE no receptor maduro sustenta a transmissão sináptica ao permitir o influxo de catiões evocado pela acetilcolina, que despolariza a placa motora e desencadeia o acoplamento excitação–contração. A função de CHRNE está intimamente ligada à maturação e à manutenção da sinapse, por meio de vias que controlam o agrupamento de recetores, a arquitetura da placa motora e a sinalização dependente de atividade. A disrupção de CHRNE está associada a síndromes miasténicas congénitas e a defeitos relacionados da transmissão neuromuscular, tornando-o relevante para estudos mecanísticos da função motora e de sinaptopatias.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Nicotinic Acetylcholine Receptor epsilon/CHRNE (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Chrne em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Chrne, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Chrne na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Nicotinic Acetylcholine Receptor epsilon/CHRNE.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Chrne para a investigação da sinalização de Nicotinic Acetylcholine Receptor epsilon/CHRNE, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Chrne críticos para a função Nicotinic Acetylcholine Receptor epsilon/CHRNE
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Chrne para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Nicotinic Acetylcholine Receptor epsilon/CHRNE Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Nicotinic Acetylcholine Receptor epsilon/CHRNE Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Chrne. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Nicotinic Acetylcholine Receptor epsilon/CHRNE Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Nicotinic Acetylcholine Receptor epsilon/CHRNE (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Chrne para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Chrne definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.