Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 7/CHRNA7 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-416614-LAC

CHRNA7 codifica a subunidade α7 do receptor nicotínico de acetilcolina (nAChR), um canal iônico homopentamérico ativado por ligante, com alta permeabilidade a Ca²⁺, que conecta a sinalização colinérgica à despolarização rápida da membrana e a cascatas subsequentes de segundos mensageiros. Em neurônios e glia, a atividade do nAChR α7 influencia a plasticidade sináptica, a liberação de neurotransmissores e vias dependentes de Ca²⁺, incluindo a sinalização MAPK/ERK e PI3K/AKT, enquanto em contextos imunes e epiteliais pode modular a produção de citocinas e a excitabilidade celular. A expressão ou função desregulada de CHRNA7 tem sido associada a fenótipos neuropsiquiátricos e do neurodesenvolvimento, incluindo endofenótipos relacionados à esquizofrenia e à epilepsia, e tem sido investigada na doença de Alzheimer e na biologia inflamatória. Como receptor de superfície que integra a ligação do ligante com a sinalização intracelular, CHRNA7 é frequentemente estudado em modelos de diferenciação neuronal, atividade de rede e dinâmica de cálcio evocada por estímulos.

As Partículas de Ativação Lentivirais Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 7/CHRNA7 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de CHRNA7 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 7/CHRNA7 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição CHRNA7, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 7/CHRNA7. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo CHRNA7 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.