Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 7/CHRNA7 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-416614-NIC

CHRNA7 codifica a subunidade α7 do receptor nicotínico de acetilcolina, um canal catiônico homopentamérico controlado por ligante que medeia sinalização colinérgica rápida e influxo de cálcio. A atividade do nAChR α7 influencia vias intracelulares dependentes de Ca²⁺, incluindo MAPK/ERK, PI3K–AKT e sinalização por CaMK, moldando assim a liberação de neurotransmissores, a plasticidade sináptica e a excitabilidade neuronal. Em contextos imunes e gliais, CHRNA7 contribui para a modulação de respostas inflamatórias por meio da regulação colinérgica da produção de citocinas. A expressão ou função desregulada de CHRNA7 tem sido associada à biologia de doenças neuropsiquiátricas e neurodegenerativas, e é amplamente estudada no contexto de cognição, filtragem sensorial e disfunção neural associada à inflamação.

Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 7/CHRNA7 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CHRNA7 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CHRNA7. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CHRNA7. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CHRNA7 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.