Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 6/CHRNA6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-418955

Visão geral

Chrna6 codifica a subunidade α6 dos receptores nicotínicos neuronais de acetilcolina (nAChRs), canais catiônicos ativados por ligante que modulam a excitabilidade da membrana e a liberação de neurotransmissores em resposta à acetilcolina e à nicotina. Os nAChRs contendo α6 são enriquecidos em circuitos dopaminérgicos e outros catecolaminérgicos, onde regulam o influxo de cálcio e moldam a sinalização e a plasticidade sinápticas. Por meio de vias de neurotransmissão colinérgica, CHRNA6 contribui para a atividade de redes relacionadas à recompensa e para a neuromodulação induzida por estímulos. Variações genéticas e funcionais em CHRNA6 têm sido associadas a respostas alteradas à nicotina e a fenótipos neurocomportamentais, sustentando sua relevância para a biologia da dependência e para modelos de disfunção de circuitos dopaminérgicos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 6/CHRNA6 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Chrna6 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Chrna6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Chrna6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 6/CHRNA6.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Chrna6 para a investigação da sinalização de Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 6/CHRNA6, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Chrna6 críticos para a função Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 6/CHRNA6
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Chrna6 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 6/CHRNA6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 6/CHRNA6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Chrna6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 6/CHRNA6 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 6/CHRNA6 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Chrna6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Chrna6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.