Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
NG2 Antibody (G-9): sc-166251. Western blot analysis of NG2 expression in SK-MEL-24 whole cell lysate (A) and rat brain tissue extract (B).
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
NG2双切口酶质粒(h): sc-400699-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- NG2 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- NG2双切酶质粒（h）和NG2双切酶质粒（h2）编码针对CSPG4的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：NG2: sc-53389，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
NG2双切口酶质粒(h) | sc-400699-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NG2双切口酶质粒(h2) | sc-400699-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CSPG4 编码跨膜硫酸软骨素蛋白聚糖 NG2。NG2 是一种多功能共受体，可调控细胞—基质相互作用及生长因子信号传导。NG2 通过与整合素/FAK、PDGF 以及 MAPK/ERK 信号相关的通路影响细胞骨架重塑、黏附与迁移，从而支持细胞的增殖性和侵袭性表型。在人体组织中，CSPG4/NG2 的表达与祖细胞样状态以及血管周围或基质相关程序有关，并常在肿瘤生物学、血管生成性重塑和治疗耐受机制的研究中被关注。因此，NG2 信号及其与细胞外基质的异常耦联与恶性进展、血管生态位动态以及由微环境驱动的可塑性等研究方向密切相关。
NG2 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 CSPG4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CSPG4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏CSPG4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了CSPG4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。