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NFS1双切口酶质粒(h) | sc-403102-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NFS1双切口酶质粒(h2) | sc-403102-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NFS1 编码一种半胱氨酸脱硫酶,它通过从 L-半胱氨酸动员硫并将其转移至 ISC 组装机器,从而在线粒体中启动从头合成铁–硫(Fe–S)簇的生物发生过程。通过这一通路,NFS1 促进依赖 Fe–S 的酶成熟,这些酶参与氧化磷酸化、硫辛酸代谢,以及维持线粒体与细胞核基因组的完整性。NFS1 功能受扰会破坏线粒体呼吸与氧化还原稳态,并进一步影响细胞增殖与应激反应。遗传学与功能研究将 Fe–S 簇组装受损与多系统线粒体疾病表型联系起来,使 NFS1 成为研究代谢脆弱性与基因组维护机制的重要靶点。
NFS1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 NFS1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对NFS1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏NFS1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了NFS1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。