NFκB p50 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421876
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NFκB p50 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico NFκB p50, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:p-NFκB p50 Anticorpo (A-8): sc-271908
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NFκB p50 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421876 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Nfkb1 codifica a NFκB p50, um componente central de ligação ao DNA da família de fatores de transcrição NF-κB, gerado pelo processamento do precursor p105. A NFκB p50 participa da sinalização canônica de NF-κB a jusante de receptores como TNFR, IL-1R e receptores do tipo Toll, regulando a expressão de genes inflamatórios, as respostas imunes inata e adaptativa, a sobrevivência celular e a sinalização de estresse. Dependendo da composição dos dímeros, complexos contendo p50 podem ativar a transcrição (por exemplo, com RelA/p65) ou reprimi-la (por exemplo, homodímeros de p50), modulando programas de citocinas e a função de macrófagos e linfócitos. A desregulação de vias conduzidas por Nfkb1 é amplamente utilizada como elo mecanístico em modelos murinos de inflamação crônica, autoimunidade, infecção e microambientes inflamatórios promotores de tumor.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO NFκB p50 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Nfkb1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Nfkb1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Nfkb1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína NFκB p50.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Nfkb1 para a investigação da sinalização de NFκB p50, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Nfkb1 críticos para a função NFκB p50
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Nfkb1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo NFκB p50 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo NFκB p50 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Nfkb1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo NFκB p50 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR NFκB p50 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Nfkb1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Nfkb1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.