非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
中性粒细胞弹性蛋白酶抗体 (D-7): sc-365950. THP-1 全细胞裂解液中中性粒细胞弹性蛋白酶表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
Neutrophil Elastase CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-400677
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Neutrophil Elastase CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在Neutrophil Elastase基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Neutrophil Elastase: sc-55549，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Neutrophil Elastase CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-400677 | 20 µg | $397.00 |
概述
ELANE 编码中性粒细胞弹性蛋白酶，这是一种与颗粒相关的丝氨酸蛋白酶，在中性粒细胞脱颗粒及 NET（中性粒细胞胞外诱捕网）形成过程中释放，用于切割细胞外基质蛋白并使微生物毒力因子失活。其活性与先天免疫信号传导、蛋白酶–抗蛋白酶平衡以及炎症级联反应相互整合，共同影响白细胞募集与组织重塑。中性粒细胞弹性蛋白酶功能失调会在气道与血管微环境中引发异常蛋白水解以及氧化/炎症应激；此外，ELANE 变异与髓系成熟受损的先天性中性粒细胞减少表型相关。因此，ELANE 被广泛用于研究中性粒细胞生物学、宿主–病原体相互作用，以及连接粒细胞生成与炎症性组织损伤的机制。
Neutrophil Elastase CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中ELANE基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对ELANE基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏ELANE开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使Neutrophil Elastase蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建ELANE缺失的细胞模型，用于Neutrophil Elastase信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 Neutrophil Elastase 功能至关重要的 ELANE 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 ELANE 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 Neutrophil Elastase CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 Neutrophil Elastase CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 ELANE 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 Neutrophil Elastase HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 Neutrophil Elastase HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由ELANE同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定ELANE靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。