Neurogenin 3 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-419234

Panoramica

Neurog3 del topo codifica il fattore di trascrizione basic helix–loop–helix Neurogenina 3, un determinante chiave della specificazione della linea endocrina durante lo sviluppo del pancreas e dell’intestino. La Neurogenina 3 integra segnali di sviluppo, inclusa la repressione mediata da Notch/Hes e cascate trascrizionali pro-endocrine, per guidare l’impegno dei progenitori endocrini e i successivi programmi di differenziamento. La sua attività coordina reti di regolazione genica che controllano le decisioni di destino cellulare, la maturazione e l’identità delle cellule produttrici di ormoni, rendendo Neurog3 un nodo centrale negli studi sullo sviluppo pancreatico e sulla biologia delle cellule endocrine. Una funzione alterata di Neurog3 è rilevante in modelli di differenziamento endocrino compromesso e nei meccanismi di malattia metabolica che coinvolgono la formazione delle isole pancreatiche.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Neurogenin 3 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Neurog3 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Neurog3 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Neurog3 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Neurogenin 3.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Neurog3 per lo studio della segnalazione di Neurogenin 3, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Neurog3 critici per la funzione di Neurogenin 3
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Neurog3 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal Neurogenin 3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal Neurogenin 3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Neurog3. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal Neurogenin 3 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR Neurogenin 3 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Neurog3 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Neurog3 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.