neurexin I Double Nickaseプラスミド (r): sc-437279-NIC

Neurexin I（NRXN1）はシナプス前部に存在する細胞接着分子で、ニューロリギンやLRRTMなどのシナプス後部パートナーに結合することで、シナプス形成と成熟を組織化します。選択的スプライシングにより、Neurexin Iはシナプス認識プログラムを多様化し、神経伝達物質放出確率、シナプス小胞のドッキング、カルシウム依存性エキソサイトーシスに影響を与え、シナプスの組み立てと可塑性を制御する経路に統合されます。ラットの神経系モデルでは、NRXN1の機能は一般に、興奮性／抑制性バランス、回路の接続性、活動依存的リモデリングとの関連で研究されています。Neurexinシグナルの変化は、神経発達・精神神経疾患の病態機構と関連づけて報告されており、in vivoおよびin vitroでシナプスの脆弱性やネットワーク表現型を解析するための標的として有用であることが示唆されています。

neurexin I ダブルニカースプラスミド（r）は、rat 細胞株における 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。

編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。