neurexin I CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401872

概要

NRXN1はニューレキシンIをコードしており、ニューレキシンIはシナプス前終末に存在する細胞接着分子として、ニューロリギンやLRRTMなどのシナプス後パートナーと結合することで、シナプス形成と成熟を組織化します。選択的スプライシングとアイソフォームの多様性を通じて、ニューレキシンIは興奮性／抑制性シナプスのバランスを整え、神経伝達物質放出確率を制御し、神経回路の結合性に重要なシナプス間（トランスシナプス）シグナル伝達を支えます。NRXN1の機能は、シナプス小胞サイクル、カルシウム依存的エキソサイトーシス、活動依存的シナプス可塑性を制御する経路とも交差します。NRXN1の遺伝学的破綻やコピー数変異は神経発達および精神神経疾患様の表現型と関連づけられており、神経系における機序解明研究の重要な遺伝子座となっています。

neurexin I CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるNRXN1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、NRXN1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、NRXN1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、neurexin Iタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、neurexin Iシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、NRXN1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• neurexin Iの機能に不可欠なNRXN1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、NRXN1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• neurexin I CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびneurexin I CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、NRXN1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  neurexin I HDRプラスミド（h）および neurexin I HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはNRXN1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のNRXN1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。