Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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Neu1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401488
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Neu1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Neu1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Neu1 Anticorpo (F-8): sc-166824
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Neu1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401488 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O NEU1 codifica a neuraminidase lisossomal 1 (Neu1), uma sialidase que remove ácidos siálicos terminais de glicoproteínas e glicolipídios para regular o catabolismo lisossomal e a renovação de receptores na superfície celular. A Neu1 atua em conjunto com o complexo proteína protetora/catepsina A para manter a atividade de enzimas lisossomais e influenciar o tráfego endocítico e a degradação ligada à autofagia. Ao modular o estado de sialilação de proteínas de membrana e secretadas, a Neu1 afeta a sinalização imune, a adesão e o remodelamento da matriz extracelular. A atividade desregulada de NEU1 está implicada em patologias de armazenamento lisossomal e em processos mais amplos, como neuroinflamação e redes de sinalização associadas a tumores, tornando-o relevante para estudos mecanísticos da homeostase glicolisossomal.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Neu1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene NEU1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do NEU1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do NEU1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Neu1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de NEU1 para a investigação da sinalização de Neu1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) NEU1 críticos para a função Neu1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos NEU1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Neu1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Neu1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus NEU1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Neu1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Neu1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia NEU1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo NEU1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.