Net CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-420157

개요

Elk3는 ETS 계열 전사인자인 Net을 암호화하며, MAPK/ERK 신호전달과 혈청반응인자(SRF) 복합체를 통합해 즉각 초기 유전자(immediate-early gene) 프로그램을 조절하는 맥락 의존적 조절자입니다. Net은 프로모터와 인핸서의 ETS 모티프에 결합하고, 인산화 상태와 보조인자(cofactor) 가용성에 따라 전사 억제자 또는 활성자로 작용할 수 있으며, 증식·이동·분화와 연관된 세포 상태 전환을 형성합니다. 마우스 연구에서는 Elk3/Net 활성이 혈관 및 기질(stromal) 생물학 분야에서 자주 다뤄지는데, 여기서 ETS–SRF 회로는 혈관신생 관련 유전자 발현과 조직 리모델링에 영향을 미칩니다. ETS 전사 네트워크의 이상 조절은 종양성 신호전달, 침윤성 표현형, 비정상적 혈관 반응과 연관되어 있어, Elk3는 기전적 경로를 규명하는 데 유용한 핵심 노드로 활용됩니다.

Net CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Elk3 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Elk3 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Elk3의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Net 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Net 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Elk3 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Net 기능에 중요한 Elk3 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Elk3 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Net CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Net CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Elk3 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Net HDR 플라스미드 (m) 및 Net HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Elk3 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Elk3 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.