NET-4 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404621-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NET-4O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase NET-4 (h) e o Plasmídeo Double Nickase NET-4 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TSPAN5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NET-4 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404621-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NET-4 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404621-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TSPAN5 codifica a tetraspanina-5 (NET-4), uma proteína de membrana com quatro passagens que organiza microdomínios enriquecidos em tetraspaninas para coordenar o agrupamento de receptores, a comunicação célula–célula e o tráfego de membrana. A NET-4 tem sido implicada na regulação da adesão e migração celular por meio de suas interações com proteínas parceiras na membrana plasmática, influenciando processos de sinalização ligados à remodelação do citoesqueleto e ao transporte vesicular. Em tecidos humanos, a expressão de TSPAN5 tem sido associada ao desenvolvimento neuronal e à organização sináptica, em linha com papéis mais amplos das tetraspaninas na modulação da dinâmica de receptores e da sinalização intercelular. Redes de tetraspaninas desreguladas, incluindo alterações de microdomínios relacionadas ao TSPAN5, são estudadas no contexto de programas de diferenciação alterados e de estados de sinalização relevantes para doenças.
NET-4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TSPAN5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TSPAN5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TSPAN5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TSPAN5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.