Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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neogenin Double Nickaseプラスミド (h): sc-401204-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- neogenin Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- neogeninダブルニカースプラスミド（h）およびneogeninダブルニカースプラスミド（h2）は、NEO1を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: neogenin 抗体 (G-7): sc-514872
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
neogenin Double Nickaseプラスミド (h) | sc-401204-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
neogenin Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-401204-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ヒトNEO1は、免疫グロブリンスーパーファミリーに属する膜貫通型のガイダンス受容体であるネオジェニンをコードしており、ネトリンおよび反発性ガイダンス分子（RGM）に結合して、軸索誘導、神経細胞移動、ならびに組織形態形成を協調的に制御する。ネオジェニンのシグナル伝達は、細胞骨格リモデリングや接着関連経路と連携し、受容体間クロストークや、細胞生存・分化の文脈依存的な制御を介して発生プログラムを調節し得る。神経系にとどまらず、NEO1は上皮組織の構築や血管・骨格の発生にも関与し、ガイダンス因子の濃度勾配を極性をもった移動や細胞間相互作用へと結び付ける。NEO1の発現変化や経路バランスの破綻は、神経発達関連の表現型や腫瘍生物学との関連が示されており、ガイダンスシグナルと細胞状態制御の機構研究において重要である。
neogenin ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における NEO1 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、NEO1内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、NEO1の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、NEO1が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。