NELF Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-408213-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NELFO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase NELF (h) e o Plasmídeo Double Nickase NELF (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para NSMF. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NELF Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-408213-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NELF Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-408213-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NSMF codifica NELF, uma proteína expressa em neurônios e regulada ao longo do desenvolvimento, implicada na orientação e migração de neurônios produtores do hormônio liberador de gonadotrofina (GnRH) e na maturação de circuitos neuroendócrinos olfatórios e reprodutivos. Processos associados a NELF se cruzam com programas de sinalização do neurodesenvolvimento que coordenam a motilidade neuronal, o direcionamento de axônios e estados transcricionais específicos de tecido durante a embriogênese. Variações genéticas em NSMF têm sido relacionadas a distúrbios do desenvolvimento puberal e ao hipogonadismo hipogonadotrófico congênito, frequentemente discutidos no contexto de fenótipos associados à anosmia. Essas associações tornam NSMF um alvo relevante para estudos mecanísticos de diferenciação neuronal, dinâmica de migração e redes de regulação gênica em modelos celulares humanos.
NELF O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus NSMF em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de NSMF. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função NSMF. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com NSMF interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.