Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Nek7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-425603
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Nek7 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Nek7, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Nek7 Anticorpo (B-5): sc-393539
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Nek7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-425603 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Nek7 (quinase relacionada à NIMA 7) é uma quinase de serina/treonina que atua como um regulador-chave da progressão mitótica, coordenando a atividade do centrossomo, a montagem do fuso e a segregação fiel dos cromossomos. Em células em proliferação, a sinalização de Nek7 sustenta transições do ciclo celular e a dinâmica dos microtúbulos, conectando o controle por quinases à organização do citoesqueleto e a checkpoints que mantêm a estabilidade genômica. Nek7 também tem sido implicada na sinalização imune inata por meio da regulação da ativação do inflamassoma NLRP3, conectando quinases do ciclo celular aos desfechos de vias inflamatórias. Assim, a atividade ou a expressão desregulada de Nek7 é relevante para estudos de proliferação aberrante, instabilidade cromossômica e fenótipos associados à inflamação em sistemas de modelos murinos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Nek7 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Nek7 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Nek7, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Nek7 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Nek7.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Nek7 para a investigação da sinalização de Nek7, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Nek7 críticos para a função Nek7
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Nek7 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Nek7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Nek7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Nek7. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Nek7 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Nek7 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Nek7 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Nek7 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.