Plasmide Double Nickase (h) Nectin 2: sc-401994-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Nectin 2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Nectin 2 Double Nickase (h) et le plasmide Nectin 2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant NECTIN2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Nectin 2 Antibody (E-1): sc-271236
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Nectin 2 | sc-401994-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Nectin 2 | sc-401994-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NECTIN2 code la nectine‑2 (CD112), une molécule d’adhésion cellulaire de type immunoglobuline localisée aux jonctions d’adhérence, où elle coordonne les contacts cellule‑cellule indépendants du Ca2+, la polarité épithéliale et l’organisation du cytosquelette via l’afadine, ainsi que par des interactions fonctionnelles avec les complexes cadhérine–caténine. La nectine‑2 participe à l’assemblage des jonctions, à la migration et à la morphogenèse tissulaire, et agit aussi comme ligand de récepteurs immunitaires tels que TIGIT, CD226 (DNAM‑1) et CD96, reliant ainsi la biologie de l’adhésion à la reconnaissance immunitaire. Une expression altérée de NECTIN2 a été rapportée dans divers contextes inflammatoires et oncogéniques, et son rôle est étudié pour son influence sur les interactions tumeur–système immunitaire, le comportement métastatique et l’intégrité des barrières. Ces propriétés font de NECTIN2 un nœud utile pour disséquer les voies qui régissent la signalisation dépendante de l’adhésion, la modulation des checkpoints immunitaires et les dynamiques épithélio‑mésenchymateuses.
Nectin 2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus NECTIN2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de NECTIN2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de NECTIN2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de NECTIN2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.