Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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NAPRT Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406144
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NAPRT O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico NAPRT, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:NAPRT Anticorpo (B-8): sc-398404
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NAPRT Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406144 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
NAPRT (nicotinato fosforribosiltransferase) é uma enzima-chave na biossíntese de NAD que catalisa a conversão de ácido nicotínico em mononucleótido de ácido nicotínico, sustentando a via de Preiss–Handler. Ao manter os reservatórios celulares de NAD, a NAPRT influencia a homeostase redox e a atividade de enzimas dependentes de NAD envolvidas no metabolismo, nas respostas ao stress e na reparação do DNA. Alterações na expressão ou na atividade da NAPRT têm sido associadas à reprogramação metabólica e a dependências de vias de salvamento de NAD observadas em múltiplos contextos de doença, incluindo cancro e condições inflamatórias. Como resultado, a NAPRT é frequentemente estudada em vias que regulam o metabolismo energético, a função mitocondrial e a resiliência celular ao stress genotóxico ou oxidativo.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO NAPRT (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene NAPRT em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do NAPRT, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do NAPRT na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína NAPRT.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de NAPRT para a investigação da sinalização de NAPRT, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) NAPRT críticos para a função NAPRT
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos NAPRT para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo NAPRT Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo NAPRT Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus NAPRT. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo NAPRT Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR NAPRT (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia NAPRT para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo NAPRT definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.