NAP1L3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407403

Visão geral

NAP1L3 (proteína 1 semelhante à proteína de montagem de nucleossomos 1) é uma chaperona de histonas da família NAP1, implicada na montagem e desmontagem de nucleossomos, sustentando a dinâmica da cromatina durante a replicação do DNA, a transcrição e o reparo do DNA. Ao modular a deposição e a troca das histonas H2A–H2B, a NAP1L3 pode influenciar a regulação epigenética, a estabilidade do genoma e transições de estado celular ligadas a programas de diferenciação. Alterações no remodelamento da cromatina e na atividade de chaperonas de histonas são frequentemente associadas a redes transcricionais desreguladas observadas no câncer e em distúrbios do desenvolvimento, tornando a NAP1L3 um alvo útil para estudos mecanísticos. Investigar a função da NAP1L3 pode ajudar a definir como vias de montagem de cromatina se conectam às respostas ao estresse replicativo e ao controle transcricional.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO NAP1L3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene NAP1L3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do NAP1L3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do NAP1L3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína NAP1L3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de NAP1L3 para a investigação da sinalização de NAP1L3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) NAP1L3 críticos para a função NAP1L3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos NAP1L3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo NAP1L3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo NAP1L3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus NAP1L3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo NAP1L3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR NAP1L3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia NAP1L3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo NAP1L3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.