NALP1A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-431476
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NALP1A O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico NALP1A, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NALP1A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-431476 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Nlrp1a do camundongo codifica a NALP1A, um receptor NOD-like citosólico que atua como sensor de inflamassoma, ligando a detecção de estresse celular à sinalização da imunidade inata. Quando ativada, a NALP1A promove a montagem de complexos de inflamassoma que levam à ativação da caspase-1 e à maturação subsequente de citocinas pró-inflamatórias, como IL-1β e IL-18, conectando o reconhecimento de perigo a programas de morte celular piroptótica. Essa via se integra ao “priming” via NF-κB, a respostas a estresse mitocondrial e a redes mais amplas de receptores de reconhecimento de padrões que regulam a inflamação tecidual. A sinalização desregulada de inflamassomas está implicada em fenótipos inflamatórios e autoimunes e é amplamente estudada no contexto de interações hospedeiro–patógeno e de gatilhos inflamatórios estéreis.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO NALP1A (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Nlrp1a em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Nlrp1a, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Nlrp1a na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína NALP1A.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Nlrp1a para a investigação da sinalização de NALP1A, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Nlrp1a críticos para a função NALP1A
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Nlrp1a para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo NALP1A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo NALP1A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Nlrp1a. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo NALP1A Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR NALP1A (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Nlrp1a para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Nlrp1a definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.