N6AMT2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406341
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- N6AMT2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico N6AMT2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:N6AMT2 Anticorpo (H-3): sc-390240
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
N6AMT2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406341 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
EEF1AKMT1 codifica a N6AMT2, uma metiltransferase de lisina que modifica fatores associados à tradução e contribui para a proteostase ao ajustar a síntese proteica e o controlo de qualidade co-traducional. A N6AMT2 tem sido associada à regulação da função dos ribossomas e ao metabolismo de RNA de forma mais ampla, ligando-a a programas de crescimento celular e ao controlo translacional adaptativo ao stress. A metilação alterada da maquinaria de tradução pode remodelar os outputs de sinalização a jusante da deteção de nutrientes e do stress proteotóxico, tornando a EEF1AKMT1 relevante para estudos sobre progressão do ciclo celular, apoptose e adaptação metabólica. A desregulação da tradução e do controlo dependente de metiltransferases é frequentemente observada em contextos de investigação em cancro e neurobiologia, sustentando a investigação da N6AMT2 em fenótipos associados a doença, sem implicar utilidade clínica.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO N6AMT2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene EEF1AKMT1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do EEF1AKMT1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do EEF1AKMT1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína N6AMT2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de EEF1AKMT1 para a investigação da sinalização de N6AMT2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) EEF1AKMT1 críticos para a função N6AMT2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos EEF1AKMT1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo N6AMT2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo N6AMT2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus EEF1AKMT1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo N6AMT2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR N6AMT2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia EEF1AKMT1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo EEF1AKMT1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.