N-type Ca CP α1B Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402397-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- N-type Ca CP α1BO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase N-type Ca CP α1B (h) e o Plasmídeo Double Nickase N-type Ca CP α1B (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CACNA1B. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
N-type Ca CP α1B Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402397-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
N-type Ca CP α1B Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402397-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CACNA1B codifica a subunidade α1B formadora do poro dos canais de cálcio do tipo N dependentes de voltagem (CaV2.2), que medeiam o influxo de Ca2+ evocado pela despolarização em células excitáveis. Esse canal acopla a atividade elétrica da membrana à fusão de vesículas pré-sinápticas e à liberação de neurotransmissores, integrando-se a redes de sinalização dependentes de Ca2+ que regulam a plasticidade sináptica, a excitabilidade neuronal e a expressão gênica dependente de atividade. A função de CACNA1B está intimamente ligada à modulação por receptores acoplados à proteína G e por vias downstream que controlam a dinâmica da transmissão sináptica. Variações genéticas ou atividade desregulada de CaV2.2 têm sido associadas a alterações no processamento nociceptivo e a fenótipos neuropsiquiátricos, reforçando sua relevância para estudos mecanísticos da função de circuitos neurais.
N-type Ca CP α1B O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CACNA1B em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CACNA1B. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CACNA1B. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CACNA1B interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.