Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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N-SMase Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405568-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- N-SMaseO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase N-SMase (h) e o Plasmídeo Double Nickase N-SMase (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SMPD2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:N-SMase Anticorpo (56-7): sc-100593
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
N-SMase Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405568-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
N-SMase Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405568-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene humano **SMPD2** codifica a **esfingomielinase neutra (N-SMase)**, uma enzima associada à membrana que hidrolisa a esfingomielina para gerar **ceramida** e **fosfocolina**, moldando assim a composição de esfingolipídios e os resultados de sinalização. A atividade da N-SMase contribui para a regulação, dependente de ceramida, de respostas ao estresse, da dinâmica de microdomínios de membrana, do tráfego endomembranar e da comunicação cruzada com programas de sinalização apoptótica e inflamatória. Por meio do controle do fluxo de ceramida, o SMPD2 influencia vias ligadas ao estresse do retículo endoplasmático (RE) e à homeostase lipídica, incluindo efeitos a jusante na sinalização **MAPK/NF-κB** e no transporte vesicular. O metabolismo de esfingolipídios desregulado envolvendo o SMPD2 tem sido estudado em contextos como neurodegeneração, disfunção metabólica e adaptação ao estresse associada ao câncer, sustentando sua relevância como alvo de pesquisa em biologia de doenças.
N-SMase O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SMPD2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SMPD2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SMPD2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SMPD2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.