N-cadherin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400109-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- N-cadherinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase N-cadherin (h) e o Plasmídeo Double Nickase N-cadherin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CDH2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:N-cadherin Anticorpo (D-4): sc-8424
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
N-cadherin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400109-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
N-cadherin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400109-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CDH2 codifica o recetor humano de adesão célula–célula N-caderina, uma caderina dependente de cálcio que estabiliza as junções aderentes através de ligação homofílica e do acoplamento às cateninas e ao citoesqueleto de actina. A N-caderina regula a morfogénese dos tecidos, o desenvolvimento neuronal e a migração coletiva de células ao coordenar a remodelação das junções, a mecanotransdução e programas de polaridade. Interage com vias que incluem a sinalização β-catenina/Wnt, a dinâmica do citoesqueleto impulsionada por GTPases da família Rho e a sinalização de recetores tirosina-quinase, influenciando a proliferação e a motilidade. A expressão ou localização desregulada de CDH2 está associada a alterações na plasticidade epitélio–mesênquima, ao comportamento invasivo e a mudanças relevantes para a doença na biologia de células vasculares e neurais.
N-cadherin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CDH2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CDH2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CDH2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CDH2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.