Myosin XVIIIA Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-436163-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Myosin XVIIIaO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Myosin XVIIIa (m) e o Plasmídeo Double Nickase Myosin XVIIIa (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Myo18a. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Myosin XVIIIa Anticorpo (H-10): sc-365328
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Myosin XVIIIA Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-436163-NIC | 20 µg | $410.00 |
Myo18a codifica a miosina XVIIIA, uma miosina não convencional que conecta a dinâmica do citoesqueleto de actina à organização e à sinalização intracelulares. Em células de camundongo, a miosina XVIIIA contribui para processos como adesão e migração celular, além da manutenção da arquitetura celular, ao coordenar complexos associados à actina e interações de ancoragem (scaffolding). A remodelação desregulada da actina e a sinalização do citoesqueleto são amplamente relevantes para fenótipos envolvendo alterações de motilidade, polaridade e organização tecidual, tornando Myo18a um alvo útil para estudos mecanísticos nessas vias. Como a remodelação do citoesqueleto se integra a vias que influenciam a proliferação e respostas ao estresse, a perturbação de Myo18a pode ajudar a dissecar como estruturas dependentes de actina moldam o comportamento celular em modelos relevantes para doenças.
Myosin XVIIIa O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Myo18a em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Myo18a. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Myo18a. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Myo18a interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.