Myosin VIIB Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421802
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Myosin VIIB O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Myosin VIIB, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Myosin VIIB Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421802 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Myo7b codifica a miosina VIIB, uma proteína motora baseada em actina enriquecida em células epiteliais polarizadas, onde contribui para a remodelação do citoesqueleto, o tráfego apical e a manutenção da arquitetura das microvilosidades. Por meio de interações com filamentos de actina e complexos associados à membrana, a miosina VIIB sustenta a montagem da borda em escova e a organização de proteínas de membrana envolvidas na absorção e na função de barreira. A disrupção de processos dependentes de MYO7B é relevante para a disfunção epitelial e a alteração da homeostase intestinal, tornando-a um alvo útil para estudar polaridade, dinâmica de junções celulares e especialização de superfície. Modelos murinos de Myo7b ajudam a investigar vias conservadas que conectam a atividade de motores de actina à morfogênese epitelial e à manutenção tecidual.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Myosin VIIB (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Myo7b em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Myo7b, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Myo7b na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Myosin VIIB.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Myo7b para a investigação da sinalização de Myosin VIIB, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Myo7b críticos para a função Myosin VIIB
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Myo7b para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Myosin VIIB Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Myosin VIIB Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Myo7b. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Myosin VIIB Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Myosin VIIB (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Myo7b para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Myo7b definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.