Myosin Vb Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403324-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Myosin VbO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Myosin Vb (h) e o Plasmídeo Double Nickase Myosin Vb (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MYO5B. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Myosin Vb Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403324-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Myosin Vb Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403324-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MYO5B codifica a miosina Vb, uma proteína motora baseada em actina que coordena o tráfego vesicular e a entrega polarizada à membrana por meio de interações com GTPases Rab e com cargas dos endossomos de reciclagem. A miosina Vb regula a reciclagem apical, a polaridade epitelial e a transcitose, influenciando assim a organização das junções apertadas e a localização de proteínas de membrana em tecidos como intestino, fígado e rim. A perturbação do tráfego dependente de MYO5B compromete a triagem endossomal e a expressão de transportadores e recetores na superfície celular, associando a alteração da função da miosina Vb a defeitos na barreira epitelial e no processamento de nutrientes. Esses processos situam MYO5B em vias centrais de transporte do citoesqueleto e de reciclagem de membrana, frequentemente investigadas em estudos de polaridade celular, dinâmica endossomal e mecanismos de doenças associadas ao tráfego intracelular.
Myosin Vb O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MYO5B em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MYO5B. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MYO5B. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MYO5B interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.