Myocardin Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (m): sc-431931-LAC
- alvos específicos: mouse
- 200 µl de alto titulo de partículas de ativação lentiviral CRISPR/dCas9 prontas para a transdução of transduction-ready
- Myocardin as Partículas de Ativação Lentiviral (m) agem como um sistema de ativação de transcrição sinergética ao mediador de ativação (SAM, que foi criado para regular positivamente com especificidade e eficiência a expressão genética via transdução celular com lentivirus
- Myocardin As partículas de ativação lentivirais (m) contem os seguintes elementos de ativação SAM:uma nuclease Cas9 (dCas9) desativada (D10A and N863A) ligadas a um domínio de transactivacao VP64, uma proteína de fusão MS2-p65-HSF1 e um alvo-especifico de RNA guia de 20 nt guia RNA. Ainda, as partículas contem genes de resistência a blasticidina, higromicina e puromicina
- Durante a transdução, o complexo SAM se liga a uma região especifica de aproximadamente 200-250 nt upstream da região de inicia da transcrição e assegura um recrutamento robusto de fatores de transcrição para uma eficiente ativação genética
- Os gRNAs codificados pelo Myocardin Plasmídeo de Ativação Lentiviral (m) e pelo Myocardin Plasmídeo de Ativação Lentiviral (m2) têm como alvo regiões reguladoras distintas do promotor Myocd. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo: Myocardin Anticorpo (E-5): sc-518132
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Myocardin Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (m) | sc-431931-LAC | 200 µl | $455.00 |
Myocd codifica a miocardina, um potente coativador transcricional que atua em parceria com o fator de resposta ao soro (SRF) para controlar programas gênicos do músculo liso e do músculo cardíaco, incluindo componentes contráteis e do citoesqueleto. Ao integrar sinais da dinâmica de actina e de vias relacionadas a RhoA/MRTF, a miocardina ajuda a coordenar a diferenciação miogênica, a maturação do músculo liso vascular e a manutenção do fenótipo contrátil. A atividade desregulada de MYOCD está associada a remodelamento vascular anormal e a alterações na plasticidade do músculo liso, o que a torna relevante para estudos do desenvolvimento cardiovascular e de mudanças na expressão gênica associadas a doenças. Assim, a miocardina de camundongo é amplamente utilizada como modelo para o controle transcricional da identidade de linhagem muscular e de redes de remodelamento responsivas ao estresse.
As Partículas de Ativação Lentivirais Myocardin (m) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de Myocd numa gama mais ampla de tipos de células humanas.
As Partículas de Ativação Lentivirais Myocardin (m) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição Myocd, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de Myocardin. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo Myocd e a arquitetura reguladora.
O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.