MYH6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400351

Visão geral

MYH6 codifica a cadeia pesada alfa da miosina cardíaca II, uma proteína motora principal do sarcômero que impulsiona a geração de força contrátil dependente de actina no músculo estriado. Por meio do ciclo de pontes cruzadas movido pela atividade ATPase, MYH6 contribui para a organização das miofibrilas, a contratilidade sensível ao cálcio e o desenvolvimento do músculo cardíaco, integrando-se a vias que regulam a montagem do sarcômero e a mecanotransdução. Alterações na expressão de MYH6 ou variações em sua sequência estão associadas a cardiomiopatias hereditárias e a fenótipos de cardiopatias congênitas, refletindo seu papel central na função miocárdica. Como um gene contrátil com expressão enriquecida em tecido, MYH6 é amplamente utilizado para investigar a maturação de cardiomiócitos, respostas ao estresse e remodelamento estrutural em sistemas modelo celulares e genéticos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MYH6 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MYH6 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MYH6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MYH6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MYH6.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MYH6 para a investigação da sinalização de MYH6, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MYH6 críticos para a função MYH6
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MYH6 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo MYH6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo MYH6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MYH6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo MYH6 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR MYH6 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MYH6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MYH6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.