MYH10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401835

概要

MYH10は、ヒト細胞において収縮力を生み出し、細胞骨格のリモデリングを支えるアクチン依存性モータータンパク質である非筋ミオシンIIBをコードします。MYH10は、ストレスファイバーや収縮環のダイナミクスを調節することで、アクトミオシンネットワークの編成、細胞移動、接着、細胞質分裂、ならびに細胞極性の維持に関与します。また、MYH10の機能は形態形成やメカノトランスダクションを制御する経路とも交差しており、モーター活性を細胞形状や組織構築の変化へと結び付けます。MYH10の発現量や活性の変化は、発生や細胞分裂の異常と関連づけられており、がんおよび神経発達疾患モデルにおける細胞骨格ダイナミクスの破綻という文脈で、しばしば研究されています。

MYH10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるMYH10遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、MYH10内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、MYH10のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、MYH10タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、MYH10シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、MYH10欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• MYH10の機能に不可欠なMYH10エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、MYH10ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• MYH10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびMYH10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、MYH10遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  MYH10 HDRプラスミド（h）および MYH10 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMYH10ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMYH10標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。