Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
MYH10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401835
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MYH10 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico MYH10, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MYH10 Anticorpo (A-3): sc-376942
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MYH10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401835 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
MYH10 codifica a miosina IIB não muscular, uma proteína motora baseada em actina que gera força contrátil e sustenta a remodelação do citoesqueleto em células humanas. Participa da organização da rede actomiosina, da migração e adesão celulares, da citocinese e da manutenção da polaridade celular por meio da regulação de fibras de estresse e da dinâmica do anel contrátil. A função de MYH10 se cruza com vias que controlam a morfogênese e a mecanotransdução, conectando a atividade motora a alterações na forma celular e na arquitetura tecidual. A expressão ou atividade alterada de MYH10 tem sido associada a defeitos no desenvolvimento e na divisão celular e é frequentemente estudada no contexto de dinâmica citoesquelética desregulada em modelos de câncer e de doenças do neurodesenvolvimento.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MYH10 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MYH10 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MYH10, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MYH10 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MYH10.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MYH10 para a investigação da sinalização de MYH10, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MYH10 críticos para a função MYH10
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MYH10 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo MYH10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo MYH10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MYH10. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo MYH10 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR MYH10 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MYH10 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MYH10 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.