Myc CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421770

概要

MycはMYC転写因子をコードしており、マウス細胞における細胞成長、バイオマスの蓄積、ならびに細胞周期進行の中心的制御因子である。MYCはE-box配列に結合して、リボソーム生合成、ヌクレオチドおよびアミノ酸代謝、ミトコンドリア機能を協調させる広範な遺伝子発現プログラムを制御するとともに、MAPK/ERK、PI3K–AKT–mTOR、WNT/β-カテニンなどの経路からのシグナルを統合する。正常な発生と組織恒常性にはMycの厳密な制御が必要であり、その制御破綻は腫瘍化や分化状態の変化と強く関連する。さらにMYCはアポトーシス、DNA複製ストレス応答、クロマチンアクセシビリティにも影響するため、がん生物学、幹細胞プログラム、代謝リモデリングの研究で広く解析されている。

Myc CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるMyc遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Myc内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Mycのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Mycタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Mycシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Myc欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Mycの機能に不可欠なMycエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Mycゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Myc CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびMyc CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Myc遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Myc HDRプラスミド（m）および Myc HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMycホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMyc標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。