Mucin 4/MUC4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-431204

Visão geral

O gene **Muc4** codifica a mucina 4 (MUC4), uma mucina transmembranar de alto peso molecular, fortemente O-glicosilada, que contribui para a proteção, hidratação e lubrificação das superfícies epiteliais. Por meio do seu domínio extracelular alongado e da sua localização na superfície celular, a MUC4 influencia as interações célula–célula e célula–matriz, modula as propriedades de barreira e pode afetar a sinalização proximal a receptores e vias a jusante ligadas à proliferação, adesão e migração. Em tecidos de camundongo, a expressão de Muc4 está associada a epitélios mucosos e a programas secretores, integrando-se a processos de glicosilação e de tráfego de membrana que moldam o glicocálix. A expressão desregulada de mucinas e alterações na glicosilação são frequentemente estudadas no contexto de inflamação, remodelamento epitelial e mudanças associadas a tumores na adesão e na sinalização.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Mucin 4/MUC4 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Muc4 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Muc4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Muc4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Mucin 4/MUC4.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Muc4 para a investigação da sinalização de Mucin 4/MUC4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Muc4 críticos para a função Mucin 4/MUC4
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Muc4 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Mucin 4/MUC4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Mucin 4/MUC4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Muc4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Mucin 4/MUC4 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Mucin 4/MUC4 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Muc4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Muc4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.