Plásmido Doble Nickase (h) Mucin 20: sc-415003-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Mucin 20 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Mucin 20 (h) y el plásmido de doble nickasa Mucin 20 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a MUC20. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Mucin 20 | sc-415003-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Mucin 20 | sc-415003-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MUC20 codifica la mucina 20, una mucina asociada a la membrana que se expresa en superficies epiteliales, donde contribuye a la estructura del glicocálix y a la modulación de las interacciones célula–célula y célula–matriz. Se ha implicado a la mucina 20 en la regulación de la señalización de receptores tirosina cinasa, incluida la modulación de la salida de la vía MET/HGF, lo que influye en la dinámica de señalización aguas abajo de MAPK/ERK y PI3K/AKT. A través de sus efectos sobre la adhesión, la migración y fenotipos asociados a la barrera, MUC20 es relevante para estudios de diferenciación epitelial y remodelación tisular. Se ha informado de una expresión alterada de MUC20 en múltiples contextos de enfermedad, lo que respalda su uso como herramienta molecular para investigar el reconfigurado de las redes de señalización y la patobiología epitelial en modelos experimentales.
Mucin 20 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus MUC20 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de MUC20. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de MUC20. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con MUC20 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.