Mts1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422782
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Mts1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Mts1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Mts1 Anticorpo (X9-7): sc-100784
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Mts1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422782 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O S100a4 de camundongo codifica Mts1, uma proteína da família S100 que se liga ao cálcio e modula a dinâmica do citoesqueleto, a motilidade celular e as interações célula–matriz por meio da regulação dependente de cálcio da remodelação de actina e de redes de sinalização associadas. Mts1 está ligado a processos como transição epitélio–mesênquima, ativação de fibroblastos e tráfego de células imunes, com conexões relatadas a vias que envolvem sinalização por GTPases Rho e remodelamento da matriz extracelular. A expressão alterada de S100a4/Mts1 é frequentemente usada como leitura molecular de estados celulares invasivos e pró-migratórios e é estudada em modelos de remodelamento tecidual associado à inflamação e em biologia tumoral. Em sistemas murinos, S100a4 também é empregado para investigar a comunicação cruzada entre estroma e sistema imune e as contribuições específicas de linhagem para o remodelamento patológico.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Mts1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene S100a4 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do S100a4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do S100a4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Mts1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de S100a4 para a investigação da sinalização de Mts1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) S100a4 críticos para a função Mts1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos S100a4 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Mts1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Mts1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus S100a4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Mts1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Mts1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia S100a4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo S100a4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.