MTF-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-411609

概要

MTF2（metal response element binding transcription factor 2）はMTF-2をコードしており、MTF-2はポリコーム群（Polycomb group）に関連するクロマチン制御因子として、系譜特異化や細胞状態の安定性を制御する転写抑制プログラムに関与します。MTF-2はPRC2機能および発生関連遺伝子座におけるH3K27メチル化依存的なサイレンシングと関連し、クロマチンアクセシビリティや長距離の遺伝子制御ネットワークに影響を与えます。こうしたエピジェネティック機構を通じて、MTF2は増殖、分化、ならびにストレス応答性の転写出力の制御に寄与します。MTF2活性の制御異常は、がん生物学や発生障害に関する研究で報告されており、ポリコームの標的化の変化が遺伝子発現の全体像（ランドスケープ）を攪乱し得ることが示されています。

MTF-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるMTF2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、MTF2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、MTF2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、MTF-2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、MTF-2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、MTF2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• MTF-2の機能に不可欠なMTF2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、MTF2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• MTF-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびMTF-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、MTF2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  MTF-2 HDRプラスミド（h）および MTF-2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMTF2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMTF2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。