MTA3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402739-NIC

A MTA3 humana (metastasis associated 1 family member 3) é um regulador associado à cromatina que atua como componente do complexo NuRD (remodelamento de nucleossomos e desacetilase), coordenando o remodelamento dependente de ATP com a desacetilação de histonas para modular programas transcricionais. Ao moldar a acessibilidade de enhancers e promotores, a MTA3 influencia processos como a manutenção da identidade celular, a proliferação e a diferenciação específica de linhagem, particularmente em contextos epiteliais. Redes de repressão/ativação dependentes de MTA3 desreguladas têm sido associadas a alterações na sinalização de transição epitélio–mesênquima e a mudanças em assinaturas de expressão gênica observadas em múltiplos modelos relevantes para doenças. Como fator epigenético nuclear, a MTA3 é frequentemente estudada para conectar o remodelamento de cromatina a desfechos de vias como transcrição responsiva a hormônios, regulação do ciclo celular e programas de resposta ao estresse.

MTA3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MTA3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MTA3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MTA3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MTA3 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.