MRP6 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402219-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MRP6O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MRP6 (h) e o Plasmídeo Double Nickase MRP6 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ABCC6. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MRP6 Anticorpo (M6II-31): sc-59618
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MRP6 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402219-NIC | 20 µg | $410.00 |
ABCC6 codifica o transportador humano da família ATP-binding cassette MRP6, uma bomba de efluxo de membrana principalmente associada à regulação da homeostase de nucleotídeos extracelulares e do pirofosfato. Ao influenciar a libertação de ATP e a sua conversão subsequente em pirofosfato inorgânico, a MRP6 ajuda a modular vias de mineralização e a remodelação da matriz extracelular. Alterações na atividade de ABCC6 estão fortemente associadas a fenótipos de calcificação ectópica e a patologia do tecido conjuntivo, incluindo o pseudoxantoma elástico, e têm sido investigadas em contextos de biologia vascular e dérmica. Estas funções ligam o ABCC6 a uma sinalização purinérgica mais ampla, ao metabolismo mineral e ao controlo, mediado por transportadores, dos microambientes tecidulares.
MRP6 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ABCC6 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ABCC6. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ABCC6. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ABCC6 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.