MRP-S6 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-413064-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MRP-S6O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MRP-S6 (h) e o Plasmídeo Double Nickase MRP-S6 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MRPS6. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MRP-S6 Anticorpo (E-8): sc-390597
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MRP-S6 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-413064-NIC | 20 µg | $410.00 |
O MRPS6 codifica a proteína ribossômica mitocondrial humana S6 (MRP-S6), um componente da subunidade pequena 28S do mitorribossomo que sustenta a tradução de subunidades da fosforilação oxidativa codificadas pelo DNA mitocondrial. Ao permitir a síntese eficiente de proteínas da cadeia respiratória, a MRP-S6 contribui para a proteostase mitocondrial, o funcionamento da cadeia de transporte de elétrons e o metabolismo energético celular. A disrupção de componentes do ribossomo mitocondrial pode prejudicar a montagem da OXPHOS e promover respostas de estresse compensatórias associadas a alterações no balanço redox e à remodelação bioenergética. Assim, o MRPS6 é relevante para estudos sobre mecanismos de disfunção mitocondrial observados em diversos fenótipos metabólicos e associados à neurodegeneração.
MRP-S6 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MRPS6 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MRPS6. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MRPS6. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MRPS6 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.