MRP-S18B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-412012

Visão geral

MRPS18B codifica a proteína ribossômica mitocondrial S18B (MRP-S18B), um componente da pequena subunidade 28S do mitorribossomo de mamíferos, necessária para a tradução de proteínas de fosforilação oxidativa (OXPHOS) codificadas pelo genoma mitocondrial. Ao apoiar a síntese de subunidades-chave da cadeia de transporte de elétrons, a MRP-S18B contribui para a capacidade respiratória mitocondrial, a produção de ATP e a homeostase redox, conectando-se a vias que controlam a proteostase mitocondrial e a sinalização integrada de estresse. Alterações na tradução mitocondrial e o desequilíbrio de OXPHOS são características recorrentes em doenças que envolvem tecidos com alta demanda energética e são frequentemente observadas em fenótipos de disfunção mitocondrial associados ao câncer e à neurodegeneração. Assim, MRPS18B é estudado em contextos como biogênese mitocondrial, reprogramação metabólica e coordenação núcleo-mitocôndria.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MRP-S18B (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MRPS18B em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MRPS18B, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MRPS18B na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MRP-S18B.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MRPS18B para a investigação da sinalização de MRP-S18B, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MRPS18B críticos para a função MRP-S18B
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MRPS18B para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo MRP-S18B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo MRP-S18B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MRPS18B. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo MRP-S18B Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR MRP-S18B (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MRPS18B para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MRPS18B definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.