Mnk2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421658
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Mnk2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Mnk2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Mnk2 Anticorpo (B-6): sc-271559
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Mnk2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421658 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Mknk2 de camundongo codifica a proteína quinase 2 de serina/treonina que interage com MAP quinases (Mnk2), um efetor a jusante das vias de sinalização ERK e p38 MAPK que modula a iniciação da tradução ao fosforilar o eIF4E e componentes relacionados da maquinaria de tradução dependente do “cap” do mRNA. Por meio desse nó, a Mnk2 integra sinais de estresse e mitogênicos para moldar a tradução seletiva de mRNAs, impactando o crescimento e a sobrevivência celular, bem como respostas inflamatórias. Alterações na atividade do eixo MNK–eIF4E têm sido associadas a programas desregulados de síntese proteica observados na biologia do câncer e em patologias mediadas pelo sistema imune, tornando o Mknk2 um ponto de entrada útil para investigar o controle traducional dirigido por MAPK em modelos murinos. A investigação funcional da Mnk2 também dá suporte a estudos de “cross-talk” de sinalização, respostas de genes imediatos e tradução dependente de contexto sob estresse.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Mnk2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Mknk2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Mknk2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Mknk2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Mnk2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Mknk2 para a investigação da sinalização de Mnk2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Mknk2 críticos para a função Mnk2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Mknk2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Mnk2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Mnk2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Mknk2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Mnk2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Mnk2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Mknk2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Mknk2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.