MMP2 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-421674-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MMP2O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MMP2 (m) e o Plasmídeo Double Nickase MMP2 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Mmp2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MMP2 Anticorpo (2C1): sc-13594
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MMP2 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-421674-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MMP2 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-421674-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene **Mmp2** do camundongo codifica a metaloproteinase de matriz 2 (MMP2), uma endopeptidase secretada dependente de zinco que degrada componentes da membrana basal e da matriz extracelular intersticial, como o colágeno tipo IV e a gelatina. A atividade da MMP2 é regulada pela secreção na forma de zimogênio e pela ativação na superfície celular em coordenação com a MT1-MMP (MMP14) e a TIMP2, o que a vincula à proteólise pericelular, à migração celular e ao remodelamento tecidual. Por meio da renovação da matriz extracelular, a MMP2 se cruza com a sinalização por integrinas, programas de transição epitélio–mesênquima e vias de remodelamento inflamatório. A desregulação da MMP2 tem sido associada ao remodelamento fibrótico, a alterações da matriz vascular e cardíaca e a fenótipos invasivos em modelos oncológicos, tornando-a um alvo frequente de estudos mecanísticos em sistemas murinos.
MMP2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Mmp2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Mmp2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Mmp2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Mmp2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.