MLL2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401659-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MLL2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MLL2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase MLL2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para KMT2D. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MLL2 Anticorpo (2E1): sc-293217
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MLL2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401659-NIC | 20 µg | $410.00 |
KMT2D (MLL2) codifica uma metiltransferase de lisina em histonas contendo domínio SET, que catalisa principalmente a mono- e a di-metilação de H3K4 em enhancers, sustentando a iniciação da transcrição e programas de expressão gênica específicos de cada tipo celular. Como regulador central da acessibilidade da cromatina, a MLL2 integra-se a complexos do tipo COMPASS para coordenar o preparo (priming) de enhancers, o comprometimento de linhagem e a transcrição responsiva a sinais ao longo de vias de desenvolvimento e imunológicas. A desregulação de KMT2D perturba o controle epigenético da diferenciação e redes transcricionais responsivas a dano no DNA, contribuindo para alterações na identidade celular e na regulação do genoma. Estudos genéticos e epigenômicos têm associado a disfunção de KMT2D a síndromes do desenvolvimento e a diversos fenótipos de remodelamento de cromatina ligados ao câncer, tornando-o um alvo importante em genômica funcional.
MLL2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus KMT2D em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de KMT2D. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função KMT2D. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com KMT2D interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.