Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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MLL Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401307-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MLLO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MLL (h) e o Plasmídeo Double Nickase MLL (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para KMT2A. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MLL Anticorpo (D-3): sc-377274
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MLL Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401307-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MLL Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401307-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KMT2A codifica a histona-lisina N-metiltransferase MLL, um regulador central do estado da cromatina que catalisa a metilação de H3K4 em promotores e enhancers para sustentar programas transcricionais que controlam o desenvolvimento hematopoético e decisões de destino celular. A MLL atua no contexto de complexos multiproteicos que coordenam o início e o alongamento da transcrição e se conecta a vias que regulam a expressão de genes HOX e a memória epigenética. A disrupção, o rearranjo ou a regulação alterada de KMT2A desorganiza redes de expressão gênica e está fortemente implicada na leucemogênese e em uma disfunção epigenética mais ampla, tornando-o um nó-chave para estudos mecanísticos do controle transcricional. As investigações comumente analisam o remodelamento de cromatina dependente de MLL, o bloqueio de diferenciação e interações com cofatores que ajustam a transcrição específica de linhagem.
MLL O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus KMT2A em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de KMT2A. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função KMT2A. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com KMT2A interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.