Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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MLF1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-417753
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MLF1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico MLF1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MLF1 Anticorpo (D-1): sc-514294
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MLF1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-417753 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O fator 1 da leucemia mieloide (MLF1) é um regulador conservado do destino das células hematopoéticas que se localiza tanto no citoplasma quanto no núcleo e participa de interações proteína–proteína que influenciam programas transcricionais e o controle do ciclo celular. Ele tem sido associado à diferenciação mieloide e à sinalização responsiva ao estresse, com papéis descritos na modulação da suscetibilidade à apoptose e da capacidade proliferativa em células com linhagem já comprometida. Alterações na expressão do MLF1 ou em sua localização subcelular têm sido associadas à biologia das malignidades hematológicas, incluindo contextos de transformação leucêmica em que checkpoints de diferenciação e crescimento estão desregulados. Como resultado, o MLF1 serve como um ponto útil para estudar vias que acoplam regulação transcricional à proliferação e à diferenciação em células humanas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MLF1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MLF1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MLF1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MLF1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MLF1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MLF1 para a investigação da sinalização de MLF1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MLF1 críticos para a função MLF1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MLF1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo MLF1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo MLF1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MLF1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo MLF1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR MLF1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MLF1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MLF1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.